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摘要
目的 优化桦树皮中桦木酸的提取纯化工艺,并研究其对斑马鱼(Danio rerio)的毒性效应。方法 采用超声辅助乙醇提取桦木酸,通过单因素实验及响应面分析优化工艺参数,再经重结晶法进行纯化,探究其对模式生物斑马鱼的毒性效应,观察并计算斑马鱼的半数致死浓度(half lethal concentration,LC50)、生存率、畸形率和主要毒性靶器官。结果 经优化验证后,最佳工艺条件为乙醇浓度75%、料液比1:25 (g/mL)、超声温度45℃、超声时间30 min,桦木酸得率达(9.15±0.01) mg/g。以异丙醇为溶剂进行桦木酸重结晶,纯化的最佳工艺参数为料液比1:25 (mg/mL)、重结晶温度0℃,重结晶时间24 h,此时桦木酸纯度达到96.49%。桦木酸对斑马鱼的LC50为0.905mg/mL,致畸的主要表现为心包水肿、卵黄囊水肿、肾性水肿和胃肠道发育延迟,质量浓度为0.2～0.6mg/mL的桦木酸没有显示出急性毒性作用。结论 优化后的纯化工艺可有效提取桦树皮中的桦木酸,且桦木酸在受试剂量下对斑马鱼胚胎及幼鱼无明显的急性毒性及致畸作用。
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