策勒黑羊ERα基因克隆、生物信息学分析及卵巢组织表达研究

作者：张继虎; 米热妮萨; 王子渲; 李琳; 邢凤; 刘书东^*

来源：中国畜牧兽医, 2022, 49(05): 1679-1687.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.05.009

• 策勒黑羊
• ERα基因
• 克隆
• 表达

【目的】克隆策勒黑羊雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)序列并进行生物信息学分析，同时测定策勒黑羊卵巢中ERα基因的表达情况。【方法】利用RT-PCR和TA克隆方法获得策勒黑羊ERα基因序列，并采用在线软件对其进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR方法检测ERα基因在策勒黑羊卵泡期、黄体期和妊娠30 d母羊卵巢中的表达情况。【结果】成功克隆获得策勒黑羊ERα基因序列，长1 791 bp,编码596个氨基酸，与山羊和牛的相似性最高。生物信息学分析显示，ERα蛋白分子式为C_(2930)H_(4600)N_(822)O_(862)S_(41),理论等电点(pI)为7.32,不稳定指数为50.33,为不稳定亲水性蛋白；存在28个O-糖基化位点和54个磷酸化位点，不存在N-糖基化位点；主要定位在细胞核中，不具备跨膜结构；二级结构主要为α-螺旋及无规则卷曲。实时荧光定量PCR检测显示，ERα基因在策勒黑羊卵泡期、黄体期和妊娠30 d的卵巢中均有表达，与卵泡期相比，黄体期ERα基因表达量极显著下降(P<0.01),妊娠30 d ERα基因表达量极显著升高(P<0.01)。【结论】策勒黑羊ERα基因序列长1 791 bp,编码596个氨基酸，为亲水蛋白，二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。ERα基因在策勒黑羊卵泡期、黄体期和妊娠30 d的卵巢中均有表达。本研究结果为进一步探究ERα基因在策勒黑羊卵巢卵泡发育、黄体形成和妊娠中发挥的作用提供参考。

• 单位
  动物科技学院; 新疆生产建设兵团; 青岛农业大学; 塔里木大学