FUNDC1通过调控线粒体分裂影响高糖损伤H9c2心肌细胞凋亡的机制研究

作者：郑君毅; 张莹莹; 刘园园; 陈孟英; 郭绪昆^*

来源：天津医药, 2022, 50(08): 791-795.

• 肌细胞,心脏
• 线粒体
• 细胞凋亡
• FUNDC1
• 信号通路

目的 探讨含FUN14域蛋白1(FUNDC1)在高糖损伤的H9c2心肌细胞中通过调控线粒体分裂影响心肌细胞凋亡的作用机制。方法 体外培养H9c2心肌细胞并建立高糖损伤模型，分别进行细胞转染，使用腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）激活剂5-氨基-4-咪唑羧基酰胺核苷（AICAR）后，分为正常对照组（CTRL组）、高糖组（HG组）、HG+shRNA-NC组（转染shRNA-NC的HG组细胞）、HG+shRNA-FUNDC1组（转染shRNA-FUNDC1的HG组细胞）和HG+AICAR组（使用AICAR的HG组细胞）。MTT法检测细胞存活率；酶标仪检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放量；激光共聚焦显微镜观察线粒体结构；Western blot检测线粒体动力相关蛋白1(DRP1)、分裂蛋白1(FIS1)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、活化的胱天蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)、FUNDC1和GAPDH的蛋白表达水平。结果与CTRL组比较，HG组细胞存活率降低，LDH释放量升高，线粒体DRP1(DRP1-mito)、FIS1、Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高，胞浆DRP1(DRP1-cyto)和Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.05）。与HG组比较，HG+shRNA-FUNDC1组细胞存活率升高，LDH释放量明显降低，DRP1-mito、FIS1、Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平降低，DRP1-cyto和Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.05）。HG+shRNA-NC组和HG组比较，各指标差异均无统计学意义（P>0.05）。CTRL组线粒体主要呈线状结构，HG组和HG+shRNA-NC组线粒体均主要呈点状结构；与HG组比较，HG+shRNA-FUNDC1组线粒体线状结构增多，点状结构减少。与CTRL组比较，HG组FUNDC1蛋白表达水平升高（P<0.05）。与HG组比较，HG+AICAR组FUNDC1蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论 FUNDC1通过调控线粒体分裂影响高糖引起的H9c2心肌细胞凋亡，AMPK信号通路参与该过程。

• 单位
  天津市胸科医院