沉默KDM5A基因对卵巢癌顺铂耐药SKOV3/DDP细胞迁移及侵袭的影响

作者：汪黎明; 冯同富^*; 陈竹; 张纯; 黄燕明; 李力

来源：中华肿瘤防治杂志, 2021, 28(12): 903-908.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2021.12.04

• 卵巢癌
• 肿瘤
• 组蛋白赖氨酸去甲基化酶5A
• 迁移
• 侵袭
• Wnt/β-catenin信号通路

目的探讨沉默组蛋白赖氨酸去甲基化酶5A(KDM5A)基因表达对卵巢癌顺铂(DDP)耐药细胞SKOV3/DDP迁移及侵袭的影响。方法通过RNAi技术将细胞分为3组:转染沉默组(SKOV3/DDP-KDM5Ai)、阴性对照组(SKOV3/DDP-NC)和未转染的空白对照组(SKOV3/DDP),蛋白质印迹法验证KDM5A基因的沉默效果,划痕实验检测3组细胞的迁移能力,Transwell侵袭实验检测3组细胞的侵袭能力,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测3组细胞中β-catenin、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达变化情况。采用单因素方差分析法比较各组间差异。结果转染沉默组、阴性对照组及空白组细胞中KDM5A蛋白的相对表达量分别为0.327 4±0.04、0.801 9±0.05和0.821 8±0.05,差异有统计学意义,F=131.466,P<0.001;其中,沉默组的表达强度低于阴性对照组(t=13.744,P<0.001)和空白组(t=14.323,P<0.001),差异有统计学意义。划痕实验结果显示,转染沉默组、阴性对照组及空白组细胞的划痕愈合率分别为(28.47±2.72)%、(50.58±4.06)%和(48.92±4.63)%,差异有统计学意义,F=30.158,P=0.007;其中,沉默组细胞的划痕愈合率低于阴性对照组(t=6.973,P<0.001)和空白组(t=6.447,P<0.001),差异有统计学意义。侵袭实验结果显示,转染沉默组、阴性对照组及空白组细胞的穿膜细胞数分别为(55.20±2.39)、(82.60±5.18)和(80.80±7.26)个,差异有统计学意义,F=41.354,P<0.001;其中,沉默组细胞的侵袭能力低于阴性对照组(t=8.129,P=0.005)和空白组(t=7.595,P=0.007),差异有统计学意义。RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,沉默组β-catenin、GSK-3β和MMP2的mRNA及蛋白表达水平低于阴性对照组和空白组,差异有统计学意义,P<0.01。结论沉默KDM5A基因可显著抑制SKOV3/DDP细胞的迁移及侵袭能力,这一过程可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

• 单位
  广西医科大学; 湖北省妇幼保健院