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摘要
目的研究原癌基因c-fos在喉鳞状细胞癌细胞TU177多药耐药形成中的作用。方法采用药物浓度梯度递增法建立稳定的喉鳞状细胞癌耐药细胞系TU177/VCR;采用RT-PCR及蛋白质印迹法检测TU177与TU177/VCR中c-fos基因和蛋白表达差异;构建靶向人c-fos基因的敲低和过表达质粒,分别转染TU177/VCR和TU177细胞;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测在TU177/VCR细胞敲低c-fos和在TU177细胞过表达c-fos后对化疗药物的敏感性。组间比较采用t检验。结果 TU177/VCR与TU177相比较,对于长春新碱(VCR)、紫杉醇(TAX)、顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)的耐药倍数分别为26.25、7.33、2.41、5.50,表明TU177/VCR耐药株构建成功;与TU177细胞相比,c-fos在TU177/VCR细胞中表达明显多,二者差异有统计学意义(P<0.05);TU177/VCR细胞敲低c-fos后细胞耐药性降低,TU177/VCR空载组半抑制浓度(IC50)值为(306.2±6.3)μmol/L,敲低组IC50值为(81.3±3.9)μmol/L,敲低组IC50是空载组IC50的27%(P<0.05);在TU177细胞过表达c-fos后细胞耐药性增加,TU177细胞空载组IC50值为(55.3±9.4)μmol/L,过表达组IC50值为(288.1±7.3)μmol/L,过表达组IC50是空载组IC50的5.21倍(P<0.05)。结论 c-fos对喉鳞状细胞癌TU177/VCR细胞的多药耐药具有重要作用,有可能成为喉癌治疗新的分子靶点。
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单位山西医科大学; 机能实验室; 基础医学院; 山西省人民医院
