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摘要
目的 克隆获得鸢尾Iris tectorum糖基转移酶基因It UGT349和ItUGT419，并对其进行生物信息学分析、基因差异表达检测和蛋白原核表达等特性分析。方法 以鸢尾转录组中筛选到的It UGTs基因全长开放阅读框（openreadingframe,ORF）设计特异性引物，进行PCR扩增，经测序后获得基因序列并进行生物信息学分析；通过荧光定量PCR(real-time PCR,q RT-PCR)进行基因差异表达检测；最后构建pET-32a（+）原核表达载体在大肠杆菌中表达蛋白。结果 PCR扩增ItUGT349和It UGT419的ORF长度分别为1461、1488 bp，编码蛋白相对分子质量大小分别为53 830、54 910。荧光定量PCR显示，It UGT349的表达量在叶片中最高，而It UGT419在花器官中表达最高。进化树表明，ItUGT419与三萜类糖基转移酶聚类在一起，ItUGT349与三萜、黄酮和木质素等多种类型的糖基转移酶聚类到一支。ItUGT349和ItUGT419在大肠杆菌中均成功的表达出可溶性蛋白。结论 通过It UGT349和ItUGT419基因全长ORF克隆，并对其进行序列分析，基因差异表达检测及原核表达等研究，为后续进一步鉴定其催化功能奠定基础。
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