铜绿假单胞菌脂肪酶Lipase基因的原核表达

作者：张煜星; 武寒雪; 祝建波; 刘焕; 周鹏

来源：安徽农业科学, 2008, 36(35): 15384-15385+15388.

DOI：10.3969/j.issn.0517-6611.2008.35.045

• 铜绿假单胞菌
• 脂肪酶
• 原核表达

[目的]对铜绿假单胞菌脂肪酶Lipase基因进行原核表达。[方法]利用PCR方法从铜绿假单胞菌基因组DNA中扩增得到脂肪酶基因,测定其核苷酸序列,利用基因重组技术构建脂肪酶基因的原核表达载体,加IPTG至终浓度为1.0 mmol/L诱导蛋白表达4 h,并进行SDS-PAGE电泳。[结果]从铜绿假单胞菌中克隆的脂肪酶基因成熟肽的序列,与NCBI上所递交的铜绿假单胞菌脂肪酶序列同源性很高,达99.36%。成功构建了脂肪酶基因的原核表达载体pET32a-Lip,进一步SDS-PAGE电泳结果显示目的基因得到高效表达。[结论]克隆的铜绿假单胞菌脂肪酶带有自身的信号肽,也可以在大肠杆菌中正常表达,可以用于进一步的研究。

• 单位
  中国热带农业科学院热带生物技术研究所; 新疆农业科学院微生物应用研究所; 生命科学学院; 石河子大学; 海南大学