高通量测序分析实验性脑脊髓炎肠道微生物变化及与IL-17、IFN-γ相关性

作者：李晓玲; 张博; 孙梦娇; 鲍彩彩; 王满侠^*

来源：微生物学报, 2019, 59(09): 1651-1659.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20180587

• 肠道菌群
• 白介素17
• γ-干扰素
• 实验性脑脊髓膜炎

【目的】通过建立实验性脑脊髓膜炎(EAE)小鼠模型,观察小鼠肠道菌群在不同发病时间点的变化和炎症因子IL-17、IFN-γ的表达情况,探讨肠道菌群的变化在EAE发病中的免疫调节作用。【方法】将48只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为正常对照组、EAE模型组各24只。EAE组采用MOG35-55与完全弗氏佐剂的混合物制备模型,进行神经功能评分,记录体重变化。分别取免疫后7、14、21、30 d的小鼠粪便,对样本DNA的16S rDNA V3/V4区基因测序。ELASE法检测IL-17、IFN-γ的表达。【结果】EAE组小鼠血液中IL-17、IFN-γ的表达从第7天开始逐渐升高,21 d时达到高峰。14 d时,EAE组与正常对照组相比,物种丰度有显著性差异(P<0.05)的菌种有:Alistipes、布牢特氏菌属、毛螺菌科NK4A136group等。30dEAE组与正常对照组相比,物种丰度有显著性差异(P<0.05)的菌种有:Allobaculum、真细菌属、螺杆菌等。通过LefSe分析,在7、14、21 d中分别主要作用的微生物菌种逐渐减少,在21d时最少。Odoribacter在21d时起了主要作用。【结论】与正常对照组相比,14、21、30dEAE小鼠肠道菌种的丰度均发生了变化,产生了肠道菌群的紊乱;其中普雷沃氏菌属NK3B31group的丰度均较正常对照组降低,与IFN-γ呈负相关(r=–0.537,P<0.01)。普雷沃氏菌属NK3B31group可能是导致MS脱髓鞘发生的关键菌属。EAE组各个时间点相比起主要作用的肠道菌群种类减少,多样性降低。其中,Odoribacter是在21 d高峰期起主要作用的菌种,但其作用机制需要深入研究。EAE组中炎症因子IL-17、IFN-γ表达的升高,促进了MOG35-55诱发的炎症反应。

• 单位
  兰州大学第一医院; 兰州大学第二医院; 神经内科