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摘要
目的介绍2种视网膜色素上皮(RPE)细胞铺片实验技术,比较其实验操作的难易程度及对RPE细胞形态和铺片完整性的影响。方法实验研究。直接铺片法:大鼠眼球取出后用4%多聚甲醛固定30 min,解剖眼球,去除眼前段部分和眼内容物,小心剥去视网膜,将RPE贴附的眼后段部分剪成花瓣形并平整贴附在载玻片上,继续固定过夜。剥离铺片法:大鼠眼球取出后用4%多聚甲醛固定过夜,解剖眼球,去除眼前段部分和眼内容物,小心剥去视网膜,用镊子将RPE-Bruch膜复合物从眼球上分离,保存在PBS液中。结果剥离铺片法能得到完整RPE细胞铺片,RPE细胞形态完整;直接铺片法中RPE细胞部分丢失,铺片边缘的RPE细胞被部分破坏。结论直接铺片法操作简便,难度小,但容易破坏边缘的RPE细胞。剥离铺片法操作难度大,但对RPE细胞破坏程度小。
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单位苏州大学附属第二医院
