鸡源九次跨膜蛋白TM9SF2基因克隆及其蛋白特征分析

作者：张敏霞; 池周颖; 瞿孝云; 刘杨; 曾庆航; 李昌; 廖明

来源：中国兽医学报, 2023, 43(11): 2298-2307.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2023.11.15

• chTM9SF2
• 克隆
• 序列分析
• 表达

根据鸡九次跨膜超家族成员2(chicken transmembrane 9 superfamily 2,chTM9SF2)预测序列设计引物，以原代鸡胚成纤维细胞CEF、鸡成纤维细胞系DF1和鸡肝癌细胞LMH的cDNA为模板，采用PCR方法扩增chTM9SF2编码序列，并利用MEGA 7.0、Clustal W、SWISS-MODEL等生物信息学工具对鸡、鸭、人、鼠等不同物种来源的九次跨膜超家族成员2(transmembrane 9 superfamily 2,TM9SF2)进行遗传进化、同源性、结构域及结构模拟等分析；进而通过构建真核表达质粒，利用Western blot、激光共聚焦显微镜探究chTM9SF2的表达和亚细胞定位。结果显示，分别在3类细胞中均可成功获得编码序列一致的chTM9SF2基因，与禽类的同源性最高，且高度保守；该基因能够在DF-1细胞中表达，且主要定位于晚期内体或溶酶体膜。结果表明，成功扩增获得chTM9SF2基因，并在DF-1细胞成功表达，分析其定位于晚期内体或溶酶体膜，为进一步研究chTM9SF2的生理功能及在病原感染中的作用奠定了基础。

• 单位
  广东省农业科学院动物卫生研究所; 华南农业大学; 人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室; 中国医学科学院