基因工程血管抑素3A蛋白的分离纯化

作者：尹芳; 陈国豪; 陆兵; 刘叶青; 徐殿胜

来源：华东理工大学学报, 2004, (04): 465-469.

DOI：10.14135/j.cnki.1006-3080.2004.04.024

• 3A蛋白
• 包涵体
• 复性
• 分离纯化 protein 3A
• inclusion body
• refolding
• purification

在8mol/mL尿素溶液中,以二硫苏糖醇(DTT)为还原剂,对基因工程血管抑素3A包涵体进行溶解实验。结果发现:1.5h后溶解的上清液蛋白浓度达26.2mg/mL。SDS-PAGE电泳扫描结果显示,3A蛋白经过SephadexG75分离后PAGE电泳纯达到100%,该步收率达85.82%,相对分子质量为10ku。采用分步稀释法对其进行复性,所获复性3A蛋白经MTT法检测表明:3A蛋白浓度为0.1μg/mL时,对内皮细胞的生长抑制率为93.4%。

• 单位
  华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室