荧光定量RT-PCR快速检测手足口病病原研究

作者：何雅青; 何丽芸; 姚相杰; 杨洪; 房师松; 舒柏华

来源：中国热带医学, 2008, 8(10): 1675-1677.

DOI：10.3969/j.issn.1009-9727.2008.10.001

• 手足口病
• 肠道病毒
• 荧光定量RT-PCR Hand-foot-mouth disease
• Enterovirus
• Real time quantitative RT-PCR

目的建立荧光定量RT-PCR技术用于检测手足口病的肠道病毒。方法利用TaqMan技术,设计一对共引物及探针,建立、优化反应体系后,构建质粒标准品,利用10倍稀释法建立相对定量标准曲线,根据TCID50倍比稀释,建立灵敏度曲线。特异性检验后利用临床标本与传统的RT-PCR法进行比较。结果定量标准曲线的灵敏度为105/μl(R2=0.999),PCR扩增效率为94%。灵敏度曲线显示检测到的最低浓度值为5.0TCID50/ml(R2=0.99),PCR扩增效率为97.6%。荧光RT-PCR检出率为80.9%,显著高于RT-PCR(检出率为62.92%)。结论研究建立的荧光定量RT-PCR方法检测肠道...

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 深圳市疾病预防控制中心