p21和p53基因甲基化在喉鳞状细胞癌中的差异化表达及生物学意义

作者：周宏; 李克勇; 吴刚; 李文平

来源：临床耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2016, 30(20): 1634-1638.

DOI：10.13201/j.issn.1001-1781.2016.20.013

• 喉肿瘤
• p21
• p53
• 甲基化

目的:研究p21、p53基因甲基化在喉癌组织和喉癌细胞系Hep-2中的机制。方法:用甲基化特异性PCR检测46例配对的喉癌组织和癌旁组织中p21、p53基因甲基化情况;用MTT法检测去甲基化药物5-azacytidine及作用时间对喉癌细胞系Hep-2增殖的影响;用TUNEL法检测5-azacytidine及作用时间对喉癌细胞系Hep-2凋亡的影响。同时,采用RT-PCR法检测干预前后p21基因mRNA的差异,并采用MSP法检测干预前后p21基因启动子区CpG岛甲基化状态变化。结果:喉癌组织、癌旁组织中p21基因启动子区CpG岛甲基化率分别为45.7%和10.9%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);喉癌组织、癌旁组织中p53基因甲基化率分别为6.5%和4.3%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。5-azacytidine对Hep-2细胞增殖的抑制作用随着时间的延长逐渐增加,呈时间依赖性;同时,随着天数的增加,细胞凋亡率增加。Hep-2细胞在5-azacytidine干预后p21基因被激活,表达明显增高。喉癌细胞系Hep-2中p21基因甲基化程度为43.13%±0.79%,经5-azacytidine干预后,甲基化程度明显下降,甚至表现为无甲基化。结论:喉癌组织和喉癌细胞系Hep-2中存在p21基因高甲基化,是喉癌区别于正常组织的分子事件。p53基因在喉癌组织和喉癌细胞系Hep-2中低甲基化,其基因的失活可能通过基因突变等其他形式来发生。去甲基化药物5-azacytidine可以通过诱导p21基因启动子CpG岛去甲基化修饰,改变肿瘤细胞细胞周期基因的调控,促进肿瘤细胞凋亡。

• 单位
  复旦大学附属浦东医院; 南京医科大学