吉富罗非鱼AFLP反应体系的建立与优化

作者：朱佳杰; 林勇; 李莉萍; **; 罗永巨; 蒋和生; 甘西

来源：基因组学与应用生物学, 2010, 29(05): 987-993.

• 吉富罗非鱼
• AFLP
• 预扩增
• 选择性扩增
• 遗传多样性 Tilapia
• AFLP
• Pre-amplification
• Selective amplification
• Genetic diversity

本文以我国水产养殖主导品种吉富罗非鱼(farmed tilapia)为研究材料,进行扩增片段长度多态性(AFLP)反应体系的研究,初步建立了一套适合罗非鱼的AFLP反应体系。对体系中关键环节的优化结果如下:基因组DNA要求无降解和RNA污染,OD260/OD280比值在1.8~2.0之间;基因组DNA EcoRⅠ/MseⅠ37℃双酶切6h、20℃连接20h,连接产物10倍稀释,PCR预扩增产物稀释45倍作为选择性扩增的模板,选择性扩增产物经6%变性丙烯酰胺凝胶电泳检测可获得条带清晰、背景干扰小的图像。该体系的构建为今后进行罗非鱼群体遗传多样性分析、种质鉴定、重要经济性状分子标记的开发及遗传连锁...

• 单位
  广西大学; 广西水产研究所