摘要

目的 研究穗花杉双黄酮(AF)调节Ras/Raf/促分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对鼻咽癌(NPC)细胞恶性生物学行为的影响。方法 将NPC细胞株CNE-1随机分为对照组、低浓度AF组(AF-L组,50μmol·L-1 AF)、中浓度AF组(AF-M组,75μmol·L-1 AF)、高浓度AF组(AF-H组,125μmol·L-1 AF)和高浓度AF+Ras激活剂RASAL1组(AF-H+RASAL1组,125μmol·L-1 AF+2 ng·mL-1 RASAL1)。以噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖能力;以划痕愈合实验检测细胞迁移能力;以Transwell实验检测细胞侵袭能力;以流式细胞术检测细胞凋亡率;以蛋白质印迹法检测细胞中Ras/Raf/MEK/ERK信号通路相关蛋白表达。结果 对照组、AF-M组、AF-H组CNE-1细胞OD490值(48 h)为0.62±0.06、0.45±0.05、0.29±0.03;细胞划痕愈合率为(38.66±4.07)%、(23.14±2.20)%、(12.47±1.15)%;细胞侵袭数目为(137.59±10.25)、(103.42±8.49)、(76.38±7.96)个;Ras蛋白表达水平分别为0.84±0.08、0.59±0.06、0.34±0.03;Raf蛋白表达水平分别为0.79±0.08、0.53±0.05、0.24±0.02;MEK蛋白表达水平分别为0.87±0.09、0.64±0.06、0.28±0.03;ERK1/2磷酸化水平分别为0.75±0.08、0.50±0.05、0.21±0.02;细胞凋亡率分别为(4.25±0.63)%、(18.42±2.10)%、(35.28±2.26)%,以上指标,AF-M组、AF-H组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。RASAL1减弱了AF对NPC细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,抑制了其凋亡。结论 AF可能通过下调Ras/Raf/MEK/ERK信号通路抑制NPC细胞增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡。

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