过表达山羊ATF3抑制肌内前体脂肪细胞分化

作者:王重洋; 罗成; 张浩; 李鑫; 李艳艳; 熊燕; 王友利; 林亚秋*
来源:生物工程学报, 2022, 38(08): 2939-2947.
DOI:10.13345/j.cjb.220299

摘要

本研究旨在探究山羊转录激活因子3 (activating transcription factor 3, ATF3)对肌内前体脂肪细胞分化的影响,并从分子水平阐明其可能作用途径。利用基因重组方法构建pEGFP-N1-ATF3过表达重组质粒,脂质体转染肌内前体脂肪细胞,通过油红O脂肪染色法从细胞形态学水平确定对分化的影响,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测脂肪细胞分化标记基因相对表达水平,从分子水平确定对分化的影响。最终成功构建pEGFP-N1-ATF3过表达载体,转染山羊肌内前体脂肪细胞后发现脂滴积聚被抑制,qRT-PCR检测到脂肪细胞分化标志基因PPARγ、C/EBPα、SREBP1极显著下调(P<0.01),C/EBPβ、AP2显著下调(P<0.05),通过ALGGEN PROMO程序预测PPARγ、C/EBPα和AP2的启动子区域存在ATF3结合位点。研究表明,过表达山羊ATF3抑制肌内前体脂肪细胞脂滴积聚,这种作用通过下调PPARγ、C/EBPα和AP2来实现,研究结果为阐明山羊ATF3调控肌内前体脂肪细胞分化机制提供重要的基础数据。

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