MiR-18a-5p通过介导自噬加重同型半胱氨酸诱导的心肌损伤

作者：尹绢; 胡龙龙; 韩雪玲; 陈露; 余玲玲; 卢寅辉^*

来源：中南大学学报(医学版), 2023, 48(01): 24-33.

• miR-18a-5p
• 心肌损伤
• 同型半胱氨酸
• 活性氧
• 自噬
• Notch2

目的：高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平是心脑血管疾病的独立危险因素。MiR-18a-5p是微RNA(microRNA,miR)家族中的重要成员，与心血管疾病密切相关。本研究旨在探讨miR-18a-5p对Hcy损伤心肌细胞的影响。方法：对H9c2细胞进行miR-18a-5p模拟物(mimic)/miR-18a-5p mimic阴性对照(negative control,NC)转染或与Hcy联合干预，另设未处理细胞作为对照组。采用实时反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription PCR,real-time RT-PCR)验证转染效率，细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平，蛋白质印迹法检测微管相关蛋白1轻链3(microtubuleassociated protein 1 light chain 3,LC3)-I、LC3-Ⅱ、Beclin1、p62、Bax、Bcl-2和Notch2的蛋白质表达水平，双荧光素酶报告分析检测miR-18a-5p与Notch2的相互作用。结果：与对照组相比，Hcy或转染miR-18a-5p mimic单独处理，或转染miR-18a-5p mimic/miR-18a-5p mimic NC与Hcy联合干预均显著降低H9c2细胞的活力，增加H9c2细胞的凋亡率和ROS的生成，上调Bax和Beclin1的蛋白质表达水平，下调Bcl-2、p62和Notch2的蛋白质表达水平，同时使LC3-Ⅱ/LC3-I值增加(均P<0.05)。与miR-18a-5p mimic NC和Hcy联合干预相比，miR-18a-5p mimic和Hcy联合干预的H9c2细胞上述指标的改变更显著，且2组之间差异有统计学意义(均P<0.05)。Notch2与miR-18a-5p存在靶向结合。结论：MiR-18a-5p通过增加心肌细胞内ROS的生成，诱导自噬和凋亡，加重Hcy诱导的心肌损伤。Notch2是miR-18a-5p的作用靶点。

• 单位
  江西省人民医院; 南昌大学第二附属医院