RICTOR在肿瘤坏死因子-α参与的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞活化中的作用

作者：郭欣; 潘云峰; 方霖楷; 郭兴华; 刘岩; 吴云婷

来源：中华风湿病学杂志, 2015, 19(01): 42-45.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1007-7480.2015.01.009

• 关节炎,类风湿
• 成纤维样滑膜细胞
• 肿瘤坏死因子-α
• RICTOR

目的初步探讨RICTOR在RA-成纤维样滑膜细胞(FLS)活化机制中的作用。方法收集3例RA患者滑膜组织,应用组织块法培养FLS。分别以浓度为10、20 ng/ml的TNF-α处理RA-FLS,利用蛋白印迹法检测RICTOR的蛋白表达水平。应用阳离子脂质体把特异性RICTOR siRNA转染RA-FLS后,再以10 ng/ml的TNF-α处理RA-FLS,使用蛋白印迹法检测RICTOR的蛋白表达水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测RA-FLS活性抑制率。统计学处理采用单因素方差分析及LSD-t检验。结果 TNF-α处理RA-FLS 48 h后,RICTOR的蛋白表达较阴性对照组明显升高(均P<0.05)。转染RICTOR siRNA后,RICTOR蛋白表达:对照组<TNF 10 ng/ml组<TNF 20 ng/ml组,吸光度相对值依次为0.35±0.06、0.60±0.09、1.10±0.12,组间两两比较差异有统计学意义(均P<0.05)。转染RICTOR siRNA后,阴性对照组、RICTOR(-)/TNF-α(-)组、RICTOR(-)/TNF-α(+)组RICTOR蛋白吸光度相对值分别为0.498 4±0.140 1、0.012 8±0.002 0、0.042 5±0.027 3,MTT检测阴性对照组、RICTOR(-)/TNF-α(-)组、RICTOR(-)/TNF-α(+)组、RICTOR(+)/TNF-α(+)组细胞活性抑制率分别为(0.7±2.0)%、(13.3±4.5)%、(15.5±4.9)%、(-7.7±5.2)%,显示无论是否加入TNF-α刺激,RA-FLS中RICTOR的蛋白表达水平均较转染阴性对照siRNA组明显下降,且RA-FLS活性抑制率较转染阴性对照siRNA组明显增高(均P<0.05)。结论沉默RICTOR所引起的RA-FLS活性抑制不能被TNF-α逆转,提示RICTOR可能在TNF-α参与的RA-FLS增殖活化机制中起着重要作用。

• 单位
  中山大学附属第三医院; 广东省第二人民医院