重组肠道病毒71型疫苗(汉逊酵母)抗原含量测定方法的建立

作者：张改梅; 陈磊; 高帆; 姚昕; 李国顺; 顾美荣; 毛群颖^*; 刘建凯; 郑海发^*

来源：中国病毒病杂志, 2018, 8(06): 476-480.

DOI：10.16505/j.2095-0136.2018.0104

• 肠道病毒71型（EV-A71）
• 疫苗
• 汉逊酵母
• 抗原含量
• 方法建立

目的建立重组肠道病毒71型疫苗（EV-A71）（汉逊酵母）抗原含量测定方法,用于重组EV-A71（汉逊酵母）疫苗的质量控制。方法以抗EV-A71 （汉逊酵母）多克隆抗体为包被抗体,经辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）标记的抗EV-A71单克隆抗体为检测抗体,建立双抗体夹心酶联免疫法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）,确定定量限度及最佳定量范围,并对该方法的准确度、精密度和特异性进行方法学验证。结果线性范围为5～80 U/ml,线性和平行性良好。定量下限为5U/ml,检测不同浓度的EV-A71国家抗原标准品,回收率在88%～115%,准确度良好;重复性和中间精密度测定,其变异系数均小于15%;与重组柯萨奇病毒A16、甲型肝炎灭活疫苗（HAV）、冻干水痘减毒活疫苗（VZV）、Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（IPV）、五价口服轮状病毒减毒活疫苗（RV）等疫苗、Tris缓冲液、PBS缓冲液、破碎液、汉逊酵母宿主蛋白（HCP）均无交叉反应,其专属性良好。结论建立了重组EV-A71疫苗（汉逊酵母）抗原含量测定方法并进行了初步验证,为疫苗研制中抗原含量的质控提供了可靠的检测手段。

• 单位
  北京民海生物科技有限公司; 中国食品药品检定研究院