CYP2C9*58型新突变体的体外酶学活性研究

作者：戴大鹏; 李传保; 王双虎; 耿培武; 胡国新; 蔡剑平

来源：医学研究杂志, 2013, (11): 58-61.

• CYP2C9
• 新突变体
• 体外酶活性研究
• 慢代谢 CYP2C9
• Novel mutation
• In vitro
• Enzymatic activity
• Slow metabolizer

目的对CYP2C9基因新突变体(CYP2C9*58型)开展体外酶学功能研究,明确其代谢活性与野生型的相关性。方法以CYP2C9基因cDNA为模板,通过定点诱变方法获得CYP2C9各变异体的cDNA全长,用以构建昆虫表达载体。利用杆状病毒包装试剂盒包装昆虫病毒,侵染sf21昆虫细胞后获得高效表达CYP2C9各型蛋白的微粒体。以甲苯磺丁脲为探针底物药,利用获得的微粒体体外测定各变异体的最大反应速率V max和米氏常数K m,评价其主要酶促动力学特性。结果成功构建了CYP2C9*1、CYP2C9*2、CYP2C9*3和CYP2C9*58型4种CYP2C9昆虫表达载体,Western blot证实该载...

• 单位
  北京医院; 温州医科大学; 丽水市人民医院