鸡三种免疫抑制性病毒多重荧光PCR的建立

作者：潘向峰; 潘登高; 刘玉洁; 韩勇^*

来源：中国畜禽种业, 2023, 19(04): 142-146.

• 禽白血病
• 禽网状内皮组织增殖病
• 鸡传染性贫血
• 荧光定量PCR
• 监测

针对禽白血病病毒（Avian leukosis virus, ALV）-p27、禽网状内皮组织增殖病病毒（Reticuloendotheliosis Virus, REV）-LTR和鸡传染性贫血病毒（Chicken infectious anemia virus, CIAV）-VP3基因保守序列，分别设计引物和TaqMan-MGB探针。人工合成目的基因在内的序列，并与载体连接后构建重组质粒ALV-p27、 REVLTR和CIAV-VP3基因，测序正确后作为标准质粒。对反应条件进行优化后建立了多重荧光定量PCR方法，对方法的敏感性、特异性、重复性进行评价并利用该方法对临床样本进行检测。结果表明，该方法特异性良好，灵敏度高，重复性好。用建立的方法对142份临床样品进行检测，分别检出ALV、 REV和CIAV阳性样品39、 27、51份。同时用商品荧光PCR试剂盒做对比，二者符合率达到100%。研究建立的多重荧光定量PCR检测方法，特异性和敏感性强、稳定性高，可快速准确的鉴别ALV、 REV和CIAV。