APPswe基因慢病毒表达质粒的构建及对其SH-SY5Y细胞生长和凋亡的影响

作者：宋喜君; 周鹤妍; 常平; 陶鹏飞; 劳凤学; 黄汉昌

来源：基因组学与应用生物学, 2020, 1-14.

• 慢病毒表达质粒
• β-淀粉样前体蛋白
• 细胞活力
• 细胞凋亡 Lentiviral expression plasmid
• Amyloid-β precursor protein
• Cell viability
• Cell apoptosis

为考察APPswe基因的表达对细胞生长和凋亡作用的影响，本研究采用gateway分子重组技术构建表达APPswe基因的慢病毒质粒，而后将该质粒转染至SH-SY5Y细胞中。用RT-PCR和Western blot技术分别测定APPswe基因的mRNA转录和蛋白翻译水平。活细胞计数法和细胞外乳酸脱氢酶法分别测定细胞存活力和细胞膜损伤程度。Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术测定细胞凋亡水平，Hoescht-33342染色观察细胞核形态变化，DCFH-DA染色法测定胞内活性氧水平。在转录和翻译水平验证表明，APPswe基因能够在SH-SY5Y细胞中相对稳定地表达。表达APPswe基因后，...

• 单位
  北京联合大学