HDAC2的表达水平评分与胆道闭锁肝纤维化进展及预后的关系

作者：徐晓丹; 王雪婷; 刘邵文; 赵一霖; 李梦迪; 赵丽; 赵林胜; 王智茹; 孙溶涓; 詹江华^*

来源：中华小儿外科杂志, 2023, 44(10).

• 胆道闭锁
• 肝纤维化
• 组蛋白脱乙酰酶
• 诊断

目的探究组蛋白脱乙酰酶(histone deacetylase, HDAC)2在胆道闭锁(biliary atresia, BA)患儿肝组织中表达水平、诊断价值及其与BA肝纤维化进展和预后的关系。方法回顾性分析2019年1月至2021年12月因黄疸在天津市儿童医院普外科行手术治疗的患儿44例, 包括BA患儿34例(BA组)和其他胆汁淤积性肝脏疾病10例(DC组)。使用生物信息学分析HDAC中HDAC1～HDAC11在BA中的表达情况。取BA组和DC组患儿肝组织样本, 通过免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测HDAC2在两组患儿肝组织中表达水平, 对HDAC2的表达进行评分。使用受试者操作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线评估HDAC2评分对BA的诊断价值。分析BA患儿HDAC2表达与一般临床资料的关系。所有BA患儿在Kasai术后均进行了随访, 记录术后6个月时的黄疸清除率(jaundice clearance rate, JCR)和自体肝生存率(survival with native liver rate, SNL)。采用Cox比例风险回归、Kaplan-Meier法分析HDAC2表达与JCR和SNL的关系。结果生物信息学分析显示, 与DC组相比, BA组中HDAC的mRNA表达含量丰富, 其中HDAC2差异具有统计学意义(log2FC =0.61, P=0.002)。免疫组织化学染色结果显示, BA组肝组织中HDAC2表达定位于多数肝细胞和胆管上皮细胞的细胞核内, 而DC组肝组织内仅少量肝细胞和胆管上皮细胞核有表达。实时荧光定量PCR结果显示, BA组肝组织中HDAC2[(15.58±2.32)比(1.42±0.42), P<0.001]、ACTA2[(2.561±0.328)比(1.150±0.196), P<0.001]和KRT19[(2.324±0.367)比(1.116±0.164), P=0.005]mRNA相对表达量高于DC组。DC组与BA组的HDAC2评分之间差异存在统计学差异[3.0(3.0～5.0)分比8.5(6.0～10.0)分, P<0.001];BA组纤维化分级Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级的HDAC2评分之间差异有统计学意义[5.5(5.0～8.0)分比9.0(7.0～10.0)分, P=0.005]。HDAC2评分诊断BA的ROC曲线下面积为0.925(95%CI:0.846～1.000, P<0.001)。HDAC2高表达患儿和低表达患儿的SNL差异有统计学意义(P=0.007)。多变量Cox回归分析显示, Kasai手术日龄较大(HR:3.764, 95%CI:1.239～11.428, P=0.019)和HDAC2高表达(HR:4.883, 95%CI:1.296～18.392, P=0.019)是BA预后不良独立危险因素。结论 HDAC2的表达水平评分具有潜在诊断价值, 与BA肝纤维化程度有关;同时其高表达可以提示不良预后, 为BA的诊断、预后评估带来新思路。

• 单位
  天津市儿童医院; 天津医科大学