摘要
目的探讨环状RNA 0000218 (circ0000218)是否通过靶向吸附miR-1182从而影响宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭。方法采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)技术分析43例宫颈癌患者癌组织、癌旁组织中circ0000218和miR-1182的表达水平。根据转染序列不同分为si-NC组、si-circ0000218组、miR-NC组、miR-1182组、pcDNA组、pcDNA-circ0000218组、si-circ0000218+anti-miR-NC组、si-circ0000218+anti-miR-1182组。运用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、Transwell实验分析circ0000218和miR-1182表达对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。蛋白质印迹法检测Ki-67、基质金属蛋白酶2 (MMP-2)和MMP9蛋白表达。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR分析circ0000218和miR-1182的靶向关系。癌旁组织与宫颈癌组织比较采用配对t检验,两组间比较采用独立样本t检验进行统计学分析。结果宫颈癌组织中circ0000218表达量高于癌旁组织 (4.17±0.32 比 1.00±0.05),而miR-1182表达量低于癌旁组织 (0.33±0.03 比 1.00±0.05),差异具有统计学意义 (P均 < 0.001)。与si-NC组比较,si-circ0000218组HeLa细胞增殖活力 (0.86±0.04 比 0.37±0.03)、迁移数量[(86.73±7.13)个比 (38.52±3.19)个]和侵袭数量[(66.80±4.95)个比 (26.58±2.55)个]以及Ki-67 (0.57±0.05比 0.18±0.02)、MMP-2 (0.74±0.07 比 0.28±0.03)和MMP-9蛋白表达量(0.64±0.04 比 0.22±0.02)降低,差异有统计学意义 (P均 < 0.001)。与miR-NC组比较,miR-1182组HeLa细胞增殖活力 (0.88±0.04 比 0.46±0.04)、迁移数量[(89.74±5.53)个比 (46.63±3.79)个]和侵袭数量[(68.03±4.34) 个比 (34.63±3.37)个]以及Ki-67 (0.59±0.04 比 0.24±0.02)、MMP-2 (0.76±0.05 比 0.33±0.03)和MMP-9蛋白表达量 (0.66±0.04 比 0.29±0.03)降低,差异有统计学意义 (P 均 < 0.001)。circ0000218靶向负调控miR-1182表达。与si-circ0000218+ anti-miR-NC组比较,si-circ0000218+ anti-miR-1182组HeLa细胞增殖活力 (0.35±0.03 比 0.76±0.04)、迁移数量[(35.58±3.11)个比 (77.04±4.08)个]和侵袭数量[(25.44±2.29)个比 (57.61±3.47) 个]以及Ki-67 (0.16±0.02比 0.46±0.04)、MMP-2 (0.26±0.02 比 0.65±0.04)和MMP-9蛋白表达量(0.20±0.02 比 0.57±0.04)升高,差异有统计学意义 (P均 < 0.001)。结论 circ0000218通过靶向吸附miR-1182可促进宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭。
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单位青岛大学附属医院; 牡丹人民医院