构建Ad-XIAP感染原代培养老年性聋模型小鼠皮层神经细胞的实验研究

作者：胡玥; 陈继川; 吴晓平; 任红苗; 姬长友

来源：山东大学耳鼻喉眼学报, 2011, (04): 16-19.

• 皮层神经细胞
• 原代培养
• -βTubulin
• Ad-XIAP
• RT-PCR Cortical nerve cells
• Primary culture
• β-Tubulin
• Ad-XIAP
• RT-PCR

目的构建携带绿色荧光(GFP)的X染色体连锁凋亡抑制蛋白基因的重组腺病毒载体(Ad-X IAP)感染体外原代培养老年性聋小鼠模型(C57BL/6J)皮层神经细胞,为后续体内基因治疗实验提供体外研究基础。方法体外培养C57BL/6J小鼠皮层神经细胞,-βTubu lin鉴定其纯度;利用Ad-Easy载体系统通过细菌内同源重组法构建携带X IAP基因的腺病毒表达载体,筛选鉴定并线性化后获得重组腺病毒载体,TC ID50法测定其滴度后转染体外原代培养的皮层神经细胞,观察其感染效率并用RT-PCR检测细胞内X IAP-mRNA表达量。结果 PCR及酶切鉴定穿梭质粒含有X IAP基因,经筛选和鉴定的Ad...

• 单位
  第三军医大学大坪医院