胎儿弯杆菌病TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：赵海玲; 刘慧芳; 杜艳芬; 司微; 王春来; 刘思国

来源：中国预防兽医学报, 2009, (11): 874-877.

• C.fetus
• 表面蛋白基因SapA
• 实时荧光PCR
• TaqMan水解探针 Campylobacter fetus
• SapA gene
• real-time PCR
• TaqMan probe

为建立胎儿弯杆菌(C.fetus)定量检测方法,本研究根据C.fetus毒力因子表面蛋白(SapA)的基因序列设计引物和一条特异的TaqMan水解探针,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测C.fetus的TaqMan荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究,结果显示,该方法检测C.fetus结果均为阳性,而非C.fetus均为阴性;对带有SapA基因的阳性质粒的检测敏感性为108拷贝～102拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,可敏感地检测到模板中13个拷贝的细菌DNA,其灵敏度是常规PCR方法的100倍。该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点。该方法为C.fetus快速检测...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 内蒙古农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室