漾濞核桃ISSR-PCR反应体系的建立

作者：陈少瑜; 杨恩; 范志远; 张雨; 习学良

来源：西部林业科学, 2007, (04): 109-112.

DOI：10.16473/j.cnki.xblykx1972.2007.04.006

• 漾濞核桃
• ISSR-PCR
• 反应体系
• 反应程序 Juglans sigillata
• ISSR
• reaction system
• amplification program

以漾濞核桃为研究对象,在从其新叶获得高质量基因组DNA的基础上,通过反应体系和反应程序的试验,建立了漾濞核桃ISSR-PCR反应体系:20 uL反应体系中Mg2+的浓度为0.225 mmol/L,引物的浓度为0.5mmol/L,dNTP的浓度为0.2 mmol/L,TaqDNA聚合酶0.6 U,2.0 uL的10×Buffer和1 uL(40 ng)的模板。反应的基本程序为:95℃预变性600 s,94℃变性30 s,50℃退火60 s,72℃链延伸120 s,35次循环后,72℃延伸420 s。针对不同引物对退火温度进行适当调整,可以获得更为理想的电泳结果;并对云南11个漾濞核桃及杂交品种进...

• 单位
  云南省林业科学院; 西南林学院