miR-186-5p靶向驱动蛋白分子14诱导髓母细胞瘤Daoy细胞凋亡的机制研究

作者：李涛; 张翠; 杨清志^*

来源：中国临床药理学杂志, 2022, 38(15): 1782-1786.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.15.019

• 髓母细胞瘤
• miR-186-5p
• 驱动蛋白家族成员14(KIF14)
• 凋亡

目的 研究miR-186-5p靶向驱动蛋白分子14(KIF14)诱导髓母细胞瘤Daoy细胞凋亡的机制。方法 以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常星形胶质NHA细胞和髓母细胞瘤D283、Daoy、D341细胞中miR-186-5p的表达水平。将髓母细胞瘤Daoy细胞分成对照组、miR-NC组(转染mimics control)、miR-186-5p组(转染miR-186-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染inhibitor control)、anti-miR-186-5p组(转染miR-186-5p inhibitor)、miR-186-5p+Vector组(共转染miR-186-5p mimics和阴性对照载体)、miR-186-5p+KIF14组(共转染miR-186-5p mimics和KIF14过表达载体)、Vector组(转染阴性对照载体)、KIF14组(转染KIF14过表达载体)。以细胞计数法-8(CCK-8)法检测增殖情况，以流式细胞术检测细胞凋亡情况，以蛋白质印迹(Western blot)法检测KIF14、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。荧光素酶报告系统鉴定miR-186-5p和KIF14的靶向关系。结果 对照组、miR-NC组、miR-186-5p组、miR-186-5p+Vector组、miR-186-5p+KIF14组的细胞增殖活性(OD值)分别为0.68±0.07,0.65±0.08,0.36±0.04,0.35±0.05和0.46±0.03,凋亡率分别为(3.26±0.54)%,(3.18±0.36)%,(11.54±1.47)%,(10.95±1.28)%和(5.63±0.62)%,Bax蛋白表达量分别为0.57±0.05,0.56±0.09,0.88±0.08,0.90±0.11和0.70±0.08,Bcl-2蛋白表达量分别为0.66±0.07,0.64±0.06,0.45±0.04,0.42±0.05和0.53±0.03,对照组、miR-NC组的上述指标与miR-186-5p组比，miR-186-5p+Vector组的上述指标与miR-186-5p+KIF14组比，差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-NC组、miR-186-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-186-5p组细胞中KIF14蛋白表达量为0.75±0.08,0.26±0.05,0.78±0.09和1.25±0.13,miR-NC组与miR-186-5p组比，anti-miR-NC组与anti-miR-186-5p组比，差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-186-5p和KIF14为靶向关系。结论 miR-186-5p靶向抑制KIF14表达诱导髓母细胞瘤Daoy细胞凋亡。