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摘要
目的报道一种改良的小鼠心室肌细胞分离方法,并观察小鼠心室肌细胞动作电位以及钾电流的电生理特性。方法采用双酶消化法分离单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录动作电位和钾电流。先记录外向钾电流(Ipeak),用低浓度4-氨基吡啶(100μmol/L)使延迟整流钾电流(IKur)失活后记录瞬时外向钾电流(Ito),用Ipeak减去Ito即可得到IKur,在完全失活IKur及Ito后可记录到稳态钾电流(Iss)。结果本法分离所得心室肌细胞横纹清晰,具有正常电生理活性,细胞池中加入层粘连蛋白后有助于细胞贴壁,从而易于形成高阻封接,并记录出小鼠心室肌细胞特征性的动作电位和钾电流。结论本实验所采用的分离方法简便,获得的小鼠心室肌细胞易于封接,且具有正常的电生理活性。
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