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摘要
目的观察微小RNA-205(miR-205)-3p及miR-205-5p对头颈部鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法下载癌症基因组图集中头颈鳞状细胞癌miRNA表达数据,分析miR-205在头颈鳞状细胞癌组织及癌旁组织中的表达。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-205-3p、miR-205-5p在头颈鳞状细胞癌细胞株54F、6-10B、CNE2、Tu686和鼻咽部黏膜组织中的表达水平;miR-205-3p、miR-205-5p抑制物及阴性对照分别转染头颈鳞状细胞癌细胞Tu686, qRT-PCR检测miR-205-3p、miR-205-5p沉默效率,后续实验分为miR-205-3p沉默组及阴性对照组、miR-205-5p沉默组及阴性对照组;CCK-8、Transwell迁移及侵袭实验检测4组细胞的增殖、迁移及侵袭能力。结果 miR-205在头颈鳞状细胞癌组织中的表达显著高于癌旁组织,其中位数(四分位数间距)分别为61 012(51 448)、28 579(35 959),差异有统计学意义(Z=-6.420, P <0.001)。头颈鳞状细胞癌细胞株5-8F、6-10B、CNE2、Tu686和鼻咽部黏膜组织中miR-205-3p表达量分别为0. 36±0. 07、0. 20±0. 06、0.15±0.04、0. 25±0.04和1.00±0. 00,差异有统计学意义(F=162.71,P<0.001)。5-8F、6-10B、CNE2、Tu686和鼻咽部黏膜组织中miR-205-5p表达量分别为0.20±0.01、0.21±0.01、1.06±0. 18、23.61±2.07和1.00±0.00,差异有统计学意义(F=371. 81,P <0.001)。与5-8F、6-10B、CNE2细胞相比,Tu686细胞中miR-205-3p的表达量高于6-10B、CNE2细胞(P=0. 195;P=0. 020),低于5-8F细胞(P=0. 023);Tu686细胞中miR-205-5p的表达量最高(P <0. 001;P <0. 001;P <0.001)。转染抑制物后Tu686细胞中miR-205-3p、miR-205-5p表达量均显著下调,沉默效率分别为87%、83%。沉默miR-205-3p组细胞在培养第1、2、3、4、5天的A值分别为0.26±0. 06、0. 55±0. 11、1. 52±0.13、1.91±0.07、2. 14±0.24,对照组分别为0.29±0.07、0.78±0.11、1.59±0.15、1.95±0.08、2.02±0.12,两组比较差异均无统计学意义(t=0.506,P=0.639;t=2.459,P=0.070;c=0.573,P=0. 597;t=0.655,P=0.548;t=-0.759,P=0.490);沉默miR-205-5P组细胞在培养第1、2、3、4、5天的A值分别为0. 30±0.08、0. 61±0. 08、0. 85±0.08、1.08±0.12、1.16±0.18,对照组分别为0.41±0. 10、0.78±0.14、1.33±0.28、1.87±0.09、2.08±0. 19,沉默组细胞在培养第3、4、5天的增殖能力均明显低于对照组,差异均有统计学意义(t=3. 665,P=0.017;t=12.223,P <0.001;t=7. 825,P<0.001)。迁移实验表明,miR-205-3p表达下调后,头颈鳞状细胞癌细胞Tu686的迁移能力无明显变化,沉默组与对照组细胞穿膜数分别为(192.00±28.49)、(188.40±22.52)个,两组比较差异无统计学意义(t=-0.160,P=0.877);miR-205-5p表达下调后,头颈鳞状细胞癌细胞Tu686的迁移能力明显减弱,沉默组与对照组细胞穿膜数分别为(109. 40±27. 63)、(183. 60±31.63)个,两组比较差异有统计学意义(t=3. 951,P=0.004)。侵袭实验表明,miR-205-3p沉默组细胞穿膜数为(93.40±10. 24)个,对照组细胞穿膜数为(96. 20±16. 56)个,两组比较差异无统计学意义(t=0.322,P=0.756);miR-205-5p沉默组细胞穿膜数为(53.00±17.80)个,对照组细胞穿膜数为(94.40±14.38)个,两组差异有统计学意义(t=4.045,P=0.004)。结论沉默miR-205-5p可抑制头颈鳞状细胞癌细胞Tu686的增殖、迁移及侵袭能力;沉默miR-205-3p对Tu686细胞增殖、迁移及侵袭能力无明显影响。
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