羊泰勒虫主要表面蛋白P32基因的克隆及真核表达载体的构建

作者：刘爱红; 关贵全; 刘军龙; 李有全; 马米玲; 牛庆丽; 任巧云; 殷宏; 罗建勋

来源：动物医学进展, 2009, (12): 17-20.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2009.12.013

• 羊泰勒虫
• 表面蛋白P32基因
• 真核表达载体 ovine Theileria
• surface protein P32 gene
• eukaryotic expression vector

提取羊泰勒虫裂殖子总RNA,用特异性引物扩增出其主要表面蛋白P32基因,并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-TEasy载体上,经PCR和EcoRⅠ酶切鉴定均为阳性的重组质粒进行了测序和分析。随后将该基因从克隆载体上双酶切,与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-MPSP-P32,转化大肠埃希菌JM109,经测序证实,基因序列完全正确。