大鼠Smad7真核表达质粒的构建及在肝星状细胞中的表达

作者：杨小艳; 杨勇; 郑勇; 李睿; 周婷; 孙侃; 常向云; 陈卫刚

来源：世界华人消化杂志, 2008, (28): 3146-3151.

• Smad7
• 构建
• 真核表达质粒
• 肝星状细胞 Smad7
• Construction
• Eukaryotic ex-pression vector
• Hepatic stellate cell

目的:构建并鉴定大鼠Smad7真核表达质粒,观察外源Smad7对肝星状细胞HSC-T6的转染,并进一步研究其对TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平的影响.方法:采用基因重组技术将Smad7cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1( ),构建大鼠Smad7真核表达质粒.脂质体介导转染HSC-T6细胞,分为正常对照组、空质粒组及转染组,G418筛选,挑取阳性细胞,运用Westernblot检测Smad7蛋白表达情况,RT-PCR检测Smad7、TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达水平.结果:酶切和测序结果证实Smad7真核表达质粒构建成功.Smad7转染组与正常对照、空质粒组比较,Sma...

• 单位
  新疆石河子大学医学院第一附属医院