一种基于琼脂糖凝胶电泳法检测SARS-CoV-2的新方法

作者：刘军花; 李学龙; 刘茜阳; 于琳; 吴珊珊; 尹秀山^*

来源：微生物学杂志, 2020, 40(03): 51-54.

• COVID-19(新型冠状病毒感染的肺炎-2019)
• SARS-CoV-2(严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2)
• PCR
• ORF1a/b基因
• 同源性
• 琼脂糖凝胶电泳法

鉴于琼脂糖凝胶电泳分析方法的准确、快速、简便等特性,优化后可以做为检出COVID-19病原的新方法。在不影响结果判读的情况下,通过对扩增时间及检测样本浓度进行优化,以达到预期目的。结果表明,检测SARS-CoV-2的最优反应程序为94℃预变性3 min;94℃变性时间、56℃退火时间及72℃延伸时间均降至5 s,且进行35个循环;最后72℃孵育5 min,最优模板用量比例(初始值设为4 ng)下限调整在(1:1 000)～(1:5 000)范围内。阳性样本测试结果符合预期。建立了一种简便、省时,适用于检测低载量病毒样本的新方法,为临床提供诊断参考。

• 单位
  沈阳化工大学; 生物工程学院