O型口蹄疫多基因重组腺病毒的构建及其免疫原性

作者：张克山; 向敏; 吴斌; 徐卓菲; 蔡利军; 王勤刚; 陈焕春

来源：中国兽医学报, 2009, (10): 1286-1289.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2009.10.013

• 口蹄疫病毒
• 腺病毒
• 重组病毒
• 免疫原性 FMDV
• adenovirus
• recombinant virus
• immunogenicity

根据GenBank公布的序列设计1对引物扩增O型口蹄疫病毒P12A3C基因并亚克隆至腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV内。含有目的基因的穿梭质粒(pShuttle-PAC)线性化后和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细菌。利用细菌内同源重组法得到重组腺病毒质粒(pAd-PAC)。在Lipofectamine 2000介导下重组腺病毒质粒转染HEK293细胞得到重组腺病毒(Ad-PAC)。半数组织培养感染剂量(TCID50)测定、免疫荧光试验(IFA)和连续传代后目的基因的PCR扩增,证实重组病毒滴度为105.5TCID50/0.1 mL,重组病毒HEK2...

• 单位
  农业微生物学国家重点实验室