重组人内皮细胞抗原成分α烯醇化酶的表达及其在弥漫性结缔组织疾病中的意义

作者：阳洪波; 郑文洁; 王汉萍; 姚志建

来源：中华风湿病学杂志, 2008, 12(11): 743-746.

DOI：10.3321/j.issn:1007-7480.2008.11.005

• 结缔组织疾病
• 磷酸丙酮酸水合酶
• 抗内皮细胞抗体

目的 对蛋白质组学分离和鉴定的抗内皮细胞抗体(AECA)相关抗原-α烯醇化酶进行基因重组和表达,榆测其特异性抗体在血管炎和其他自身免疫性疾病患者血清中的阳性率.方法 聚合酶链反应(PCR)扩增人enol基冈CDS片段并与表达载体重组,在大肠杆菌中表达和纯化重组人α烯醇化酶.用质谱鉴定后的重组蛋白作为抗原,用点印迹法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别检测健康人和不同结缔组织病患者血清中抗人α烯醇化酶抗体水平.结果 克隆了人enol基因cDNA片段.将重组的人α烯醇化酶在大肠杆菌中进行原核表达和纯化.用重组蛋白作为抗原,点印迹法检测健康对照和不同结缔组织病患者血清中抗人α烯醇化酶抗体,证实:①系统性血管炎(SV)、系统性红斑狼疮(SLE)、干燥综合征(SS)和类风湿关节炎(RA)患者血清中抗α烯醇化酶抗体的阳性率分别为76.7%、78.3%、63.6%和78.9%,均明显高于多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)组和健康对照组(P<0.01).②系统性血管炎中自塞病(BD)、多发性大动脉炎(TA)、韦格纳肉芽肿病(WG)、显微镜下多动脉炎(MPA)和Churg-Strauss综合征(CSS)患者血清中抗α烯醇化酶抗体阳性率各为74.0%、81.5%、62.5%、92.3%和80.0%.③SV和SLE患者血清中抗α烯醇化酶抗体的阳性率与SS和RA患者血清中该抗体的阳性率差异无统计学意义(P>0.05).④不同患者血清中抗α烯醇化酶抗体强阳性者所占比例分别为:SV 51.7%,SLE 33.3%,SS42.9%,RA 20.0%.RA组与SV组差异有统计学意义(P<0.05).结论 SV和SLE、SS、RA患者血清中均存在不同水平的抗α烯醇化酶抗体,α烯醇化酶是AECA识别的自身抗体之一.

• 单位
  中国医学科学院; 国家人类基因组北方研究中心; 北京协和医院; 中国协和医科大学