大口黑鲈溃疡综合征病毒MCP基因的原核表达及重组蛋白的免疫效果初步分析

作者：马冬梅; 邓国成; 白俊杰; 江小燕; 曹婷婷; 蔡磊

来源：生物技术通报, 2016, 32(08): 139-144.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.08.021

• 大口黑鲈
• 溃疡综合征病毒
• 主要衣壳蛋白
• 原核表达
• 免疫效果

为了预防近年来流行于广东省养殖大口黑鲈(Micropterus salmoides)中的病毒性溃疡综合征,以大口黑鲈溃疡综合征病毒(Largemouth bass ulcerative syndrome virus,以下简称LBUSV)的主要衣壳蛋白(MCP)作为目标抗原蛋白,将MCP基因开放阅读框插入到pBV220载体中,转化大肠杆菌DH5α,构建重组表达MCP蛋白的工程菌。重组菌经过42℃温度诱导和SDSPAGE电泳,检测到在分子量51 k D处有一条特异表达蛋白带,重组蛋白约占重组菌体总蛋白的30%。重组MCP蛋白经洗涤、纯化、溶解、复性和透析后纯度达90%以上。将纯化后的重组蛋白与不完全弗氏佐剂混合、乳化后,免疫大口黑鲈,然后进行感染实验,感染后20 d疫苗保护率最高达67.7%。结果表明,该病毒MCP蛋白具有一定的免疫原性,可以作为制作重组疫苗的候选蛋白。

• 单位
  农业部; 中国水产科学研究院珠江水产研究所