髓源树突状细胞对Ⅱ型胶原诱导关节炎小鼠 CD4+CD25+Treg细胞的影响

作者：龚艳杰; 魏明^*

来源：国际检验医学杂志, 2023, 44(09): 1085-1094.

• 类风湿关节炎
• 胶原诱导
• 树突状细胞
• 调节性T细胞

目的 研究髓源树突状细胞(BMDCs)对Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)的影响及作用机制。方法 从40只雄性BALB/c小鼠中，随机选择10只颈椎脱臼法处死，收集来自骨髓的单核细胞，用白细胞介素(IL)-4、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及脂多糖(LPS)分别诱导使其成为未成熟树突状细胞(imDC)及成熟树突状细胞(mDC),同时应用流式细胞术对细胞表型进行分析，采用免疫印迹法(Western blotting)检测共刺激分子CD80、CD86和主要组织相容性复合体(MHCⅡ)蛋白表达。另取上述小鼠30只，采用Ⅱ型胶原免疫，建立类风湿关节炎(RA)小鼠模型。在免疫之后第6天，按照随机数字表法把小鼠分为空白对照组(10只)、imDC组(10只)和mDC组(10只),分别沿小鼠尾静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS)、imDC和mDC;于免疫之后第7天对3组小鼠进行免疫强化操作，于免疫强化之后第21天检测3组小鼠的关节变形情况，并测定关节炎指数(AI)评分；酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blotting测定小鼠血清转化生长因子(TGF)-β和IL-10的表达，流式细胞术检测小鼠脾脏组织Treg细胞比例。结果 髓源单核细胞经IL-4+GM-CSF诱导后，其共刺激分子CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达率分别为36.80%±5.86%、32.80%±6.42%、56.80%±5.36%,即为imDC;经IL-4+GM-CSF+LPS诱导后，其共刺激分子CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达率分别为90.03%±7.38%、89.87%±7.10%、93.03%±7.76%,即为mDC;结果表明，树突状细胞(DC)成功诱导分化为imDC和mDC。强化免疫后第21天，imDC组AI评分[(7.28±1.45)分]显著高于mDC组[(13.78±2.14)分]和空白对照组AI评分[(12.31±1.83)分],差异有统计学意义(P<0.05);imDC组血清IL-10和TGF-β[(11.32±2.17)pg/mL和(27.15±4.71)pg/mL]显著高于mDC组[(5.47±1.83)pg/mL和(11.64±2.67)pg/mL]及空白对照组[(4.96±1.79)pg/mL和(12.06±2.25)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05);imDC组脾脏Treg细胞比例(4.62%±1.03%)显著高于mDC组(3.05%±0.87%)和空白对照组(3.03%±0.91%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 髓源imDC可缓解CIA小鼠的病情，促进抗炎细胞因子IL-10和TGF-β表达，加快Treg细胞增殖，从而导致免疫耐受。

• 单位
  郑州大学第五附属医院