两种乙肝肝纤维化小鼠复合模型的比较

作者：黄恺; 孙鑫; 赵志敏; 彭渊; 陶艳艳; 刘成海^*

来源：中国实验动物学报, 2019, 27(05): 598-603.

DOI：10.3969/j.issn.1005-4847.2019.05.008

• 动物模型
• 乙型肝炎病毒
• 炎症
• 肝纤维化
• 病理学

目的采用C57BL/6 N-Tg (1.28HBV)/Vst型乙肝病毒转基因小鼠与rAAV8-1.3HBV腺相关病毒转染小鼠联合CCl4腹腔注射诱导乙肝肝纤维化小鼠模型,比较两种小鼠模型的病毒学及生化病理特点。方法实验分野生型对照组(WT)、rAAV8-1.3HBV转染组(rAAV)、CCl4组(CCl4)、rAAV8-1.3HBV复合CCl4模型组(rAAV+CCl4),C57BL/6 N-Tg(1.28HBV)/Vst乙肝病毒转基因组(Tg)、转基因复合CCl4组(Tg+CCl4),共计造模12周。ELISA试剂盒测定血清HBsAg、HBeAg水平,荧光定量PCR法检测血清HBV-DNA载量,肝组织石蜡切片免疫组化染色观察肝内HBsAg及HBcAg的表达,生化试剂盒测定血清ALT、AST、AKP,盐酸水解法检测肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量。HE染色及天狼星红染色观察炎症与胶原等病理变化。结果除WT组、CCl4组,其余各组ELISA检测血清HBsAg、HBeAg均呈阳性,同时荧光定量PCR检测HBV-DNA载量均高于1.0×104 IU/mL。其中Tg+CCl4组HBsAg、HBeAg含量高于rAAV+CCl4组。rAAV、rAAV+CCl4组HBV-DNA水平高于Tg、Tg+CCl4组。免疫组化表明:除WT组、CCl4组,其余各组肝组织中HBsAg与HBcAg均呈阳性。rAAV组对比Tg组,HBsAg表达减少;rAAV组相比Tg组,HBcAg表达明显增多。Tg+CCl4与rAAV+CCl4相比,HBsAg结果无明显差异,rAAV+CCl4组HBcAg阳性表达明显增高。生化结果显示:CCl4组、Tg+CCl4组、rAAV+CCl4组血清ALT、AST及肝组织Hyp含量均显著升高;其中Tg+CCl4组Hyp含量高于rAAV+CCl4组。AKP结果对比WT组无明显差异。病理结果表明:对比WT组,rAAV与Tg组炎症与胶原沉积不明显;CCl4组、Tg+CCl4组、rAAV+CCl4组炎症反应及胶原沉积明显增高,其中Tg+CCl4组胶原沉积高于rAAV+CCl4组。结论两种复合模型符合乙肝肝纤维化模型需求,其差异主要集中于病毒学指标以及病理改变。rAAV+CCl4组在HBV-DNA载量上具有优势,Tg+CCl4组在纤维化进展更为明显。

• 单位
  上海中医药大学附属曙光医院