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摘要
目的观察杜仲叶绿原酸提取物(CAEF)联合西红花苷对人肝癌细胞Hep G2胆固醇代谢的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将人肝癌细胞Hep G2随机分为空白对照组、油酸诱导组、辛伐他汀组、CAEF组、联合用药组。油酸诱导组、辛伐他汀组、CAEF组、联合用药组分别加入油酸诱导脂肪变性模型;同时,辛伐他汀组加入10μmol/L的辛伐他汀10μL,CAEF组加入25 mg/L的CAEF 10μL,联合用药组加入含1μmol/L西红花苷、30μmol/L绿原酸、10μmol/L京尼平苷、10μmol/L槲皮素的混合液10μL;空白对照组仅加入等体积培养基。取各组干预48 h细胞,行油红O染色,检测细胞内中性脂滴含量。取干预24、48 h细胞上清液,检测TC、TG含量。采用RT-PCR法检测胆固醇代谢相关基因(ABCA1、SREBP2、CYP7A1、LXRα、AMPK2α、HMGCR)表达,免疫细胞化学法和Western blotting法检测HMGCR蛋白表达。结果辛伐他汀组、CAEF组、联合用药组干预48 h,细胞内中性脂滴含量明显降低,其作用强度依次为联合用药组>CAEF组>辛伐他汀组(P均<0.05);与对照组比较,CAEF组、联合用药组干预24、48 h时细胞外液TC、TG含量明显增加,细胞外液TC、TG含量依次为联合用药组>CAEF组>辛伐他汀组(P均<0.05)。CAEF组、联合用药组ABCA1、CYP7A1、AMPK2αmRNA表达明显升高,SREBP2、HMGCR mRNA表达明显降低(P均<0.05);此外,联合用药组LXRαmRNA表达明显降低(P<0.05)。辛伐他汀组、CAEF组、联合用药组HMGCR蛋白表达明显降低,以联合用药组降低最明显(P均<0.05)。结论 CAEF联合西红花苷可协同抑制肝癌细胞脂质积聚,其作用机制可能与调控肝癌细胞胆固醇代谢相关基因和蛋白的表达有关。
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