狂犬病病毒基质蛋白的真核表达及鉴定

作者：杨硕; 李小姣; 武志强; 刘瑞熙; 刘兰军; 杨志荣

来源：四川大学学报(自然科学版), 2014, 51(04): 829-834.

• 狂犬病病毒
• 基质蛋白
• 杆状病毒表达系统
• 重组杆状病毒
• Sf9昆虫细胞

本文设计并合成了狂犬病病毒PV株基质蛋白(matrixprotein,MP)基因与优化的PV株基质蛋白基因,分别克隆至转移载体pVL1393中构建穿梭质粒,再以穿梭质粒与线性化的杆状病毒BaculoGoldTM进行重组,构建表达MP的重组杆状病毒,然后感染Sf9昆虫细胞进行表达.通过SDS-PAGE电泳分析显示,表达的MP和优化后MP约分别为27kDa和26kDa.间接免疫荧光检测(IFA)显示,表达的MP和优化后MP均可与鼠抗His单克隆抗体及鼠抗RV血清特异性结合,出现明显的特异性绿色荧光.Western blot检测显示,表达的MP和优化后MP均可被鼠抗His单克隆抗体特异性识别.

• 单位
  成都蓉生药业有限责任公司; 四川大学; 生命科学学院