铜绿假单胞菌重组Bb(pGEX-OprF-Ⅰ)疫苗免疫及PA01株攻击小鼠后诱导脾细胞因子基因变化的研究

作者：梁诚诚; 李文桂^*

来源：中国病原生物学杂志, 2020, 15(04): 434-457.

DOI：10.13350/j.cjpb.200414

• 铜绿假单胞菌
• 重组Bb(pGEX-OprF-Ⅰ)疫苗
• 细胞因子

目的观察铜绿假单胞菌重组Bb(pGEX-OprF-Ⅰ)疫苗免疫及PA01株攻击小鼠后诱导的保护力及脾细胞因子INF-γ、IL-12、IL-4、IL-17和Treg的变化。方法将BALB/c小鼠随机分为疫苗组、空载体对照组和Bb对照组,每组7只。取5×108 CFU疫苗每日灌胃1次,每周连续3d,共3周。初次接种后4周用5×107 CFU/10μl的PA01株进行滴鼻攻击。攻击后2周杀鼠,取肺计数细菌负荷,取脾制备脾细胞悬液,经PaAg刺激培养,PCR扩增脾细胞的INF-γ、IL-12、IL-4、IL-17和Treg基因。结果疫苗组肺细菌菌落数为(0.27±0.02)×108 CFU,空载体组为(7.37±0.89)×108 CFU,Bb对照组为(7.42±0.80)×108 CFU,差异有统计学意义(P<0.01);疫苗组脾细胞扩增出399bp的INF-γ基因片段、300bp的IL-12基因片段、359bp的IL-4基因片段、380bp的IL-17基因片段和250bp的Foxp3基因片段,两对照组扩增均阴性。结论重组Bb(pGEX-OprF-Ⅰ)疫苗可诱导小鼠脾细胞产生多种类型的细胞因子,参与抗Pa感染的免疫应答。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院