花姜酮通过免疫原性死亡影响黏液表皮样癌的机制研究

作者：苏凤芹; 苏慧; 吴慧炜; 邢淑华

来源：河北医科大学学报, 2023, 44(07): 767-772.

• 癌,黏液表皮样
• 内质网应激
• 免疫原性死亡

目的 探究花姜酮(zerumbone, Zer)治疗黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma, MEC)的机制研究，以期为临床上开发MEC靶向治疗药物提供新的思路以及理论依据。方法 购入MEC细胞系H292及H3118,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑[3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide, MTT]检测出Zer对MEC细胞系的IC50;在IC50的浓度下，进一步通过集落形成实验检测细胞增殖，利用流式细胞术检测细胞凋亡及表面钙网蛋白(calreticulin, CRT)蛋白水平，Western blot检测细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)表达水平，观察Zer是否可以影响MEC的免疫原性死亡；最后为探寻Zer可能的分子调控机制，采取pcDNA3.1-STAT3上调MEC细胞中信号转导因子和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的水平，通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测转染效率及qRT-PCR、Western blot检测内质网应激相关因子活化的转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、ATF3及转录因子同源蛋白(C/EBP-homologous protein, CHOP)的表达水平，三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)测定试剂盒检测培养基中ATP含量，MEC。结果 Zer组细胞凋亡率高于Control组(P<0.05),Zer组H3118细胞上清液中HMGB1蛋白含量高于Control组(P<0.05),Zer组H3118细胞中ATP含量高于Control组(P<0.05),Zer组细胞内质网应激相关基因ATF4、ATF3及CHOP的蛋白和mRNA表达水平均高于Control组(P<0.05),Zer组的MEC细胞中STAT3 mRNA水平低于Control组(P<0.05),Zer+oe-STAT3组细胞内质网应激相关基因ATF4、ATF3及CHOP的蛋白和mRNA表达水平均低于Zer+oe-NC组(P<0.05)。结论 Zer介导STAT3促进MEC细胞内质网应激由此诱导MEC细胞免疫原性死亡。