摘要
目的探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤对荜茇酰胺抗肿瘤作用的影响。方法实验分为对照组:采用生理盐水处理A549细胞48h;荜茇酰胺组:3μM荜茇酰胺处理细胞48h;荜茇酰胺+N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组:3μM荜茇酰胺和10mM NAC处理细胞48h;3-甲基腺嘌呤+荜茇酰胺组:3μM荜茇酰胺和3mM 3-甲基腺嘌呤处理细胞48h。采用CCK-8法测定细胞活力,使用流式细胞仪测定细胞内活性氧(ROS)水平,蛋白质印迹法检测细胞自噬蛋白(LC3B)表达。结果 3μM荜茇酰胺处理A549细胞后,细胞ROS水平显著升高至(1.49±0.18)(P<0.05),细胞活力显著下降至(60.1±10.2)%(P<0.05),LC3B-II表达显著增加(P<0.05)。荜茇酰胺与10mM NAC合用后,细胞ROS水平为(0.98±0.04),细胞活力为(97.7±4.0)%,LC3B-II表达下降至用药前水平(P<0.05)。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤处理肺癌细胞后,LC3B-II表达显著降低。3-甲基腺嘌呤+荜茇酰胺组A549细胞活力为(24.8±1.3)%,显著低于荜茇酰胺组(60.1±10.2)%(P<0.05)。结论荜茇酰胺通过ROS依赖途径促进A549细胞自噬。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤可增强荜茇酰胺的抗肿瘤作用。
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单位浙江医院