摘要

目的探讨凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor, AIF)核转位在海藻糖抑制氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation, OGD)诱导的SH-SY5Y细胞死亡过程中的作用及机制。方法选取对数期生长的SH-SY5Y细胞,将细胞分为正常组、N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine, NAC)组、海藻糖组、OGD组、OGD+NAC组、OGD+海藻糖组,MTT法检测各组细胞生存率,活性氧(reactive oxygen species, ROS)检测试剂盒检测细胞ROS变化,荧光显微镜观察2,7-二氯荧光黄双乙酸盐(2,7-Dichlorodi-hydrofluorescein diacetate, DCFH-DA)荧光探针标记OGD组细胞ROS荧光强度;使用小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)敲减SH-SY5Y细胞AIF基因,将细胞分为空转组、scrambled组、AIFsiRNA组、OGD空转组、OGD scrambled组、OGD AIFsiRNA组,使用MTT法检测细胞生存率,western blot检测AIF在细胞线粒体、细胞质、细胞核中的蛋白表达。结果与正常组相比,OGD组细胞生存率降低(P<0.05),ROS积累增多,ROS荧光强度增强;与OGD组相比,OGD+海藻糖组、OGD+NAC组和OGD AIFsiRNA组细胞生存率升高,OGD+海藻糖组细胞ROS水平降低(P<0.05);与正常组相比,OGD组细胞细胞质、细胞核AIF蛋白表达上调,线粒体AIF蛋白表达下调(P<0.05);与OGD组相比,OGD+海藻糖组细胞细胞质、细胞核AIF蛋白表达下调,线粒体AIF蛋白表达较OGD组表达上调(P<0.05)。结论 OGD诱导SH-SY5Y细胞死亡,可能与氧化应激水平提高导致AIF核转位有关;海藻糖可通过降低OGD引起的细胞氧化应激水平,抑制AIF核转位进而挽救细胞死亡。

  • 单位
    牡丹江医学院; 牡丹江医学院附属红旗医院

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