推拿技衮法介导机械敏感性离子通道Piezo1对骨骼肌损伤模型大鼠细胞凋亡的影响

作者：黄博; 阮磊; 王兰兰; 薛惠天; 孙梦龙; 段苗苗; 彭亮^*

来源：湖南中医药大学学报, 2023, 43(12): 2249-2255.

• 骨骼肌损伤
• 推拿
• ?法
• 细胞凋亡
• Piezo1
• 胱天蛋白酶-3
• B淋巴细胞瘤-2

目的 观察推拿?法对骨骼肌损伤模型大鼠的机械敏感性离子通道Piezo1及细胞凋亡的影响，探讨推拿?法治疗骨骼肌损伤的作用机制。方法 32只SD大鼠随机分成正常组、模型组、?法组、?法+抑制剂组，每组8只。采用肌内注射200μL虎蛇毒素（notexin, NTX）(10μg/mL)制备大鼠腓肠肌损伤模型。造模24 h后，?法组使用实验动物?法器模拟?法治疗，滚动频率为140次/min，每天2次，每次3 min，连续治疗3 d；?法+抑制剂组在实施?法治疗前，给予腹腔注射Piezo1抑制剂GsMTx4(270μg/kg)，每天1次，连续注射3 d；正常组和模型组腹腔注射等体积生理盐水。采用平衡木测试进行行为学评估，HE染色观察腓肠肌组织显微结构变化，TUNEL染色计算腓肠肌组织细胞凋亡率，Western blot法检测大鼠腓肠肌组织Piezo1、B淋巴细胞瘤-2(B-lymphoma-2, Bcl-2)、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白质（B-lymphoma-2 related X protein, Bax）、胱天蛋白酶-3(cysteine aspartic acid specific protease-3,Caspase-3)表达。结果 与正常组比较，模型组和?法+抑制剂组平衡木行走时间延长（P<0.01），滑爪次数增加（P<0.01），腓肠肌细胞凋亡率升高（P<0.01），腓肠肌组织Piezo1、Bcl-2蛋白表达降低（P<0.01）,Bax、Caspase-3蛋白表达升高（P<0.05），肌细胞破裂、坏死、大小不一，排列稀疏、无规律，周围有大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润。与模型组比较，?法组平衡木行走时间缩短（P<0.01），滑爪次数减少（P<0.01），腓肠肌细胞凋亡率降低（P<0.01），腓肠肌组织Piezo1、Bcl-2蛋白表达升高（P<0.01）,Bax、Caspase-3蛋白表达降低（P<0.05），肌细胞病理情况好转，有少量细胞破裂、萎缩、坏死，细胞间隔缩小，轻度局灶性炎性细胞浸润。与?法组比较，?法+抑制剂组平衡木行走时间延长（P<0.01），滑爪次数增多（P<0.01），腓肠肌细胞凋亡率增高（P<0.01），腓肠肌组织Piezo1蛋白表达降低（P<0.05）,Caspase-3蛋白表达升高（P<0.01），见较多肌细胞萎缩、坏死、大小不一，排列间隔较大，周围仍有一定数量中性粒细胞和淋巴细胞浸润。结论 推拿?法可促进骨骼肌运动功能恢复，缓解骨骼肌损伤，其作用机制可能与激活Piezo1，抑制细胞凋亡有关。

• 单位
  湖南中医药大学第一附属医院; 湖南中医药大学