番鸭细小病毒YL08株VP2和VP3蛋白的原核表达及免疫反应性

作者:李静; 谢鹏宇; 于天飞*; 柳芳芳; 尹海畅; 于志丹
来源:江苏农业科学, 2022, 50(09): 169-173.
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2022.09.027

摘要

为获得番鸭细小病毒(muscovy duck parvovirus, MDPV)重组结构蛋白VP2、VP3,本研究以含有MDPV YL08株VP1基因的重组载体pET-32a-VP1为PCR扩增模板,分别亚克隆VP2、VP3基因。构建了重组载体pGEX-6p-VP2、pGEX-6p-VP3并将它们转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中,分别构建了重组菌株pGEX-6p-VP2/Rosetta(DE3)和pGEX-6p-VP3/Rosetta(DE3)。2种重组菌株在IPTG诱导下分别获得了重组蛋白GST-VP2和GST-VP3,分子质量分别为91、86 ku。Western blot分析结果表明,重组蛋白GST-VP2和GST-VP3可特异性结合GST-tag单克隆抗体和MDPV感染番鸭血清,免疫反应性良好。Dot-ELISA比较分析结果表明,在等质量条件下,GST-VP2的免疫反应性强于GST-VP3。

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