siRNA-Ambra1促进结直肠癌细胞的增殖和迁移

作者：成海春; 董功航; 郑晓彬; 刘华山; 周驰; 胡拓

来源：肿瘤, 2017, 37(11): 1152-1161.

• 结直肠肿瘤
• 细胞增殖
• 细胞运动
• 肿瘤浸润

目的 :探讨Ambra1对结直肠癌SW480和HCT15细胞增殖和迁移的影响,及其可能的作用机制。方法:将靶向Ambra1基因的siRNA转染至结直肠癌SW480和HCT15细胞,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Ambra1 mRNA和蛋白的表达,克隆形成和实时无标记细胞分析(real-time cellular analysis,RTCA)实验检测siRNA-Ambra1对结直肠癌SW480和HCT15细胞克隆形成和增殖能力的影响,Transwell小室法和划痕愈合实验检测siRNA-Ambra1对SW480和HCT15细胞迁移和侵袭能力的影响,蛋白质印迹法检测siRNAAmbra1对SW480和HCT15细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(N-cadherin、E-cadherin和Vimentin)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路相关蛋白以及c-myc蛋白表达的影响。结果:siRNA-Ambra1可抑制SW480和HCT15细胞中Ambra1 mRNA和蛋白的表达(P值均<0.05),促进SW480和HCT15细胞的克隆形成、增殖、迁移和侵袭(P值均<0.05)。siRNA-Ambra1可上调SW480和HCT15细胞中EMT相关蛋白N-cadherin的表达水平(P值均<0.05),下调E-cadherin的表达水平(P值均<0.05),上调ERK信号通路关键蛋白磷酸化ERK1/2(phosphorylated ERK1/2,p-ERK1/2)的表达水平(P值均<0.05)。结论:沉默Ambra1基因可通过EMT及ERK信号通路促进结直肠癌SW480和HCT15细胞的增殖、迁移和侵袭。

• 单位
  中山大学附属第六医院; 广州医科大学