2型重组腺相关病毒对脐血CD34~+造血干/祖细胞的转导条件的优化

作者：陈焱; 陈方平; 王光平; 彭建强; 吴小兵; 吴新华

来源：临床血液学杂志, 2006, (02): 97-100.

• 脐血
• 干细胞
• 造血祖细胞
• 绿色荧光蛋白
• 基因转导

目的:探索不同转导条件下2型重组腺相关病毒(rAAV-2)/绿色荧光蛋白(GFP)对人脐血CD34+细胞的转导效率。方法:人脐血CD34+细胞分别以IL-3加IL-6加干细胞因子(SCF)加Flt3配体(FL)(预刺激1组)或SCF加FL加血小板生长因子(预刺激2组)预刺激48 h后,转导rAAV-2/GFP,转导后2 d和7 d收集细胞,流式细胞仪检测GFP的表达,同时以金黄地鼠胚胎肾细胞(BHK-21)细胞作为阳性对照。结果:感染复数(MOI)为2×105病毒基因组(v.g)/cell时,rAAV-2/GFP能有效地转导CD34+细胞,2 d的GFP阳性率可达(28.05±4.47)%(S/F/T组),(27.44±4.99)%(3/6/S/F组),最高达43.36%,随着培养时间的延长,GFP表达有下降的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。预刺激1组、预刺激2组与无预刺激组的GFP阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05),预刺激1组与预刺激2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MOI 2×105v.g/cell时,采用细胞因子预刺激可得到rAAV-2/GFP对人脐血CD34+细胞的有效转导,但本实验采用的2种预刺激条件对转导效率的提高没有明显区别。

• 单位
  中南大学湘雅医院