吡格列酮联合5-氮杂胞苷干预对大鼠胰岛素瘤细胞增殖、凋亡及功能的影响

作者：李莉; 李松; 石晓娟; 王顺阁; 王雪; 陈民

来源：疑难病杂志, 2017, 16(02): 182-103.

• 吡格列酮
• 5-氮杂胞苷
• 胰岛素瘤细胞
• B细胞淋巴瘤-2
• 多糖聚合酶
• 大鼠

目的观察吡格列酮(PGZ)联合5-氮杂胞苷(5-AzaC)干预对大鼠胰岛素瘤细胞增殖、凋亡及胰岛素分泌量的影响。方法 2015年6月—2016年6月于河南省平顶山市第二人民医院内分泌科进行实验。将大鼠胰岛素瘤细胞(RIN-m5f)行体外原代及传代培养,将培养好的细胞分为5组:空白组(不加任何试剂)、模型组[白细胞介素-1 3(IL-1β)2 ng/ml+干扰素γ(IFN-γ)100 U/m1]、吡格列酮组(IL-1β2 ng/ml+IFN-γ100 U/ml+PGZ 15μmol/L)、5-AzaC组(IL-Iβ2 ng/ml+IFN-γ100 U/ml+5-AzaC 1.5μ.mol/L)及PGZ+5-AzaC组(IL-1β2 ng/ml+IFN-γ100 U/ml+PGZ 15μmoL/L+5-AzaC 1.5μmol/L)。应用倒置显微镜观察RIN-m5f细胞形态学的变化,流式细胞仪测定RIN-m5f细胞凋亡情况,应用Western blot法检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、多糖聚合酶(PGZRP)表达情况,应用ELISA法检测葡萄糖刺激胰岛素分泌能力。结果 RIN-m5f细胞培养24 h、48 h、72 h后应用流式细胞仪可观察到PGZ组、5-AzaC组、PGZ+5-AzaC组和RIN-m5f细胞凋亡率低于模型组(qPGZ组=12.122、8.452、8.252,P均<0.05;qt5-AzaC组=12.252、8.563、7.529,P均<0.05;qPGZ+5-AzaC组=8.563、7.452、8.963,P<0.05),PGZ+5-AzaC组细胞凋亡率低于PGZ组与5-AzaC组(qPGZ组=7.022、6.986、8.523,P均<0.05;q5-AzuC组=8.963、9.123、10.523,P均<0.05),培养48 h、72 h后PGZ+5-AzaC组细胞凋亡率较培养24 h时显著下降(q=5.996、6.789,P均<0.05)。Bcl-2、PGZRP表达水平:模型组>PGZ组>5-AzaC组>PGZ+5-AzaC组(q=7.896、8.233、9.102,P均<0.05)。PGZ+5-AzaC组葡萄糖刺激胰岛素分泌能力大于PGZ组、5-AzaC组(q=8.252、7.896,P均<0.05),5-AzaC组葡萄糖刺激胰岛素分泌能力大于PGZ组,差异均有统计学意义(q=8.123,P<0.05)。结论 PGZ联合5-AzaC能有效抑制高糖诱导大鼠胰岛素瘤凋亡,恢复胰岛素瘤分泌能力,其作用机制可能与其能下调Bcl-2、PGZRP表达水平有关。

• 单位
  平顶山市第二人民医院