circ0003998对肺腺癌细胞上皮间质转化的作用和机制

作者：焦会珍^*; 金小乐; 苑萌; 王天伦

来源：国际呼吸杂志, 2023, 43(11).

• 肺腺癌
• RNA, 环状
• 微RNAs
• 上皮-间质转化

目的研究circ0003998对肺腺癌细胞上皮间质转化的作用和机制。方法本研究为实验研究。培养肺上皮细胞株BEAS-2B和肺腺癌细胞株A549、H1299、H1395、H1975, 检测各细胞株中circ0003998、miR-218的表达水平。通过转染阴性对照(NC) 干扰小RNA、circ0003998干扰小RNA、NC微小RNA抑制物核苷酸序列或miR-218抑制物核苷酸序列, 将A549细胞分为si-NC组、si-circ0003998组、si-circ0003998+miR-NC抑制物组、si-circ0003998+miR-218抑制物组;通过转染NC微小RNA核苷酸序列或miR-218核苷酸序列, 将A549细胞分为miR-NC组和miR-218组。通过Transwell迁移实验检测细胞迁移能力, 荧光定量聚合酶链反应实验检测circ0003998、Bmi-1 mRNA、E-cadherin mRNA、N-cadherin mRNA、miR-218的表达水平, 蛋白质印迹法检测Bmi-1、E-cadherin、N-cadherin的蛋白表达水平, 双荧光素酶报告基因实验检测miR-218与circ0003998、Bmi-1的靶向关系, 逆转实验验证miR-218抑制物逆转si-circ0003998的作用。结果肺腺癌细胞株中circ0003998的表达水平均高于肺上皮细胞株, miR-218的表达水平均低于肺上皮细胞株(均P<0.05), 其中A549细胞中上述表达的变化最显著。si-circ0003998组circ0003998、穿膜细胞数目、N-cadherin mRNA、N-cadherin蛋白、Bmi-1 mRNA、Bmi-1蛋白表达水平均低于si-NC组, miR-218、E-cadherin mRNA、E-cadherin蛋白表达水平均高于si-NC组(t值分别为15.21、15.53、9.76、7.82、12.02、9.93、11.51、10.00、7.28, 均P<0.001)。miR-218组野生型circ0003998质粒、野生型Bmi-1质粒的荧光素酶活性均低于miR-NC组(t值分别为13.61、14.68, 均P<0.001)。si-circ0003998+miR-218抑制物组穿膜细胞数目、N-cadherin mRNA、Bmi-1 mRNA、N-cadherin蛋白、Bmi-1蛋白表达水平均高于si-circ0003998+miR-NC抑制物组, miR-218、E-cadherin mRNA、E-cadherin蛋白表达水平均低于si-circ0003998+miR-NC抑制物组(均P<0.05)。结论 circ0003998通过miR-218/Bmi-1轴促进肺腺癌细胞上皮间质转化。

• 单位
  河北北方学院附属第一医院